E tele enzymes e masani ona fa'aaogaina i su'ega PCR

Polymerase chain reaction, fa'apu'upu'u peiPCRi le Igilisi, ose molecular biology technique e faʻaaogaina e faʻalautele ai vaega faʻapitoa DNA.E mafai ona manatu o se DNA faʻapitoa faʻapipiʻi i fafo atu o le tino, lea e mafai ona faʻateleina ai se aofaiga laʻititi o DNA.I le taimi atoaPCRfa'agaioiga tali, e tasi le vasega o vaila'au e iai sona sao taua - enzymes.

1. Taq DNA

I faʻataʻitaʻiga i aso muamua oPCR, na faʻaaogaina e saienitisi Escherichia coli DNA polymerase I, Ae o loʻo i ai se faʻafitauli i lenei enzyme: e manaʻomia le toe faʻatumu o le enzyme fou i taimi uma e faia ai se taʻamilosaga, lea e fai ai si laʻasaga laʻititi o le taotoga ma e faigata ona faʻateleina atoatoa.O lenei faʻafitauli na foia ina ua faʻafuaseʻi ona vavaeeseina e saienitisi Taq DNA polymerase mai Thermus aquaticus i le 1988. Talu mai lena taimi, o le faʻateleina otometi o le DNA ua avea ma mea moni.O le mauaina o lenei enzyme e faia foiPCRtekinolosi o se tekinolosi faigofie, aoga ma lautele.I le taimi nei, Taq DNA polymerase o le polymerase sili ona taatele i pusa DNA.

2. PfuDNA

E pei ona taʻua i luga, o le Taq DNase o loʻo i ai se pusa tele, o lea ua suia ai e saienitisi le Taq DNA polymerase i se tulaga faʻapitoa ina ia aloese mai le faʻalauteleina o le le faʻapitoa ona o le le fetaui, e mafua ai le le saʻo o suʻega.Ae o le suiga ole Taq DNA polymerase e mafai ona taofia le gaioiga ole DNA polymerase ile vevela ole potu.E mafai e le PfuDNA polymerase ona fa'amalieina tulaga le lelei o lo'o ta'ua i luga ole Taq DNA polymerase, ina ia mafai ai ona fa'atinoina le tali a le PCR, ma fa'aleleia atili ai le tulaga manuia o le fa'atupuina o le kenera.

3. Reverse Transcriptase

Reverse transcriptase na maua i le 1970. O lenei enzyme e faʻaogaina le RNA e fai ma faʻataʻitaʻiga, dNTP e fai ma sui, mulimuli i le mataupu faavae o le faʻapipiʻiina o le faavae, ma faʻapipiʻi se DNA e tasi e faʻaopoopo i le RNA template i le 5′-3′ itu.Reverse transcriptase e fa'alagolago tele i le DNA polymerase activity mai DNA po'o RNA templates ma o lea e leai se 3'-5' exonuclease gaioiga.Ae ui i lea, o loʻo i ai le RNase H gaioiga, lea e faʻatapulaʻaina ai le umi o le faʻasologa o le faʻasologa o le transcriptase i se tulaga patino.Ona o le maualalo o le faamaoni ma le thermostability o wild reverse transcriptase, na suia foi e saienitisi.

MoPCRfa'ata'ita'iga, o mea fa'aaoga autu e: ta'ito'atasi PCR paipa, 4/8-strip PCR paipa, PCR ipu.

Labio'sPCR fa'aaogainamaua mea neimanuia:

Papatusi PCR: Feso'ota'iga va'ava'a va'ava'a;E maualuga le eseesega, faigofie ona iloa lelei;lelei fela'uaiga fa'afoliga; leleifelauaiga vevela;DNase fa'amaonia, RNase, DNA, PCR inhibitors, ma fa'ata'ita'iina e leai se pyrogen.

Paipa PCR ta'ito'atasi: Fa'asao-tete'e; leleifelauaiga vevela;manino lelei opitika; DNase faamaonia, RNase, DNA, iniseti PCR, ma tofotofoina pyrogen-saoloto.

4/8-strips paipa PCR: Ultra-manifinifi puipui; maualuga manino; lelei felafolafoaiga ata;e mafai ona faʻaaogaina i falemaʻi falemaʻi, alamanuia meaʻai, ma mole mole biology; tulaga maualuga, taupou PP mea; DNase faamaonia, RNase, DNA, PCR inhibitors, ma tofotofoina pyrogen-saoloto.